Le HEPES est utilisé dans de nombreux milieux car son effet tampon est supérieur au bicarbonate de sodium à pH physiologique (7,2-7,4) à 37 ° C. Le bicarbonate de sodium est nutritionnellement nécessaire pour la plupart des cellules, de sorte que le HEPES devrait être ajouté en plus et non à la place du bicarbonate de sodium. Il est couramment ajouté à des concentrations de 10 à 25 mM (des niveaux plus élevés peuvent provoquer une cytotoxicité).
